細胞培養(yǎng)中消除組織培養(yǎng)污染的實驗步驟是怎樣的

　　當重要的培養(yǎng)污染時，研究者可能試圖消除或控制污染。首先，確定污染物是細菌、真菌、支原體或酵母，把污染細胞與其它細胞系隔離開，用實驗室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺，檢查HEPA過濾器。 高濃度的抗生素和抗霉菌素可能對一些細胞系有毒性，因而，做劑量反應實驗確定抗生素和抗霉菌素產(chǎn)生毒性的劑量水平。這點在使用抗生素如兩性霉素B和抗霉菌素如泰樂菌素時尤其重要。下面是我司推薦的確定毒性水平和消除培養(yǎng)污染的實驗步驟：
 

　　1. 在無抗生素的培養(yǎng)基中消化、計數(shù)和稀釋細胞，稀釋到常規(guī)細胞傳代的濃度。
 

　　2. 分散細胞懸液到多孔培養(yǎng)板中，或幾個小培養(yǎng)瓶中。在一個濃度梯度范圍內(nèi)，把選擇抗生素加入到每一個孔中。例如，兩性霉素B推薦下列濃度，0.25，0.50，1.0，2.0，4.0,8.0 mg/ml。
 

　　3. 每天觀測細胞毒性指標，如脫落，出現(xiàn)空泡，匯合度下降和變圓。
 

　　4. 確定抗生素毒性水平后，使用低于毒性濃度2～3倍濃度的抗生素的培養(yǎng)液培養(yǎng)細胞2～3代。
 

　　5. 在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)細胞一代。
 

　　6. 重復步驟4。
 

　　7. 在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)4～6代，確定污染是否以已被消除。
 

　　我司分析細胞培養(yǎng)細胞培養(yǎng)技術(shù)也叫細胞克隆技術(shù)，在生物學中的正規(guī)名詞為細胞培養(yǎng)技術(shù)。不論對于整個生物工程技術(shù)，還是其中之一的生物克隆技術(shù)來說，細胞培養(yǎng)都是一個不可少的過程。